米根霉Rhizopus oryzae-白地霉SHMCCD54120-糠秕马拉色菌(糠秕孢子菌)
One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)还具备高灵敏度和高特异性的
在分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Hot-Start Taq DNA Polymerase则是这一技术中的一颗璀璨明珠。它以其独特的机制和卓越的性能,为PCR反应的精准性和特异性提供了强有力的保障。 传统的Taq DNA聚合酶在室温下就具有活性,这意味着在PCR反应开始之前,引物可能会与模板发生非特异性结合,导致背景产物的产生,从而影响实验结果的准确性。而Hot-Start Taq DNA Polymerase通过特殊的化学修饰或物理方法,解决了这一问题。它在室温下处于“关闭”状态,只有在高温下才会被激活,从而有效避免了非特异性扩增的发生。 Hot-Start Taq DNA聚合酶的激活机制通常基于两种方式。一种是通过化学修饰,如在酶的活性位点引入可逆的化学基团,这些基团在高温下被去除,从而恢复酶的活性。另一种是通过物理方法,如将酶与抗体结合,抗体在高温下变性失活,从而释放出具有活性的Taq酶。无论哪种方式,其核心目标都是确保Taq酶在PCR反应的变性阶段才开始发挥作用。
它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。
总之,4S Green Plus 无毒核酸染料以其安全、高效和环保的特点。
蛋白A-微球菌核酸酶(Protein A-MNase,简称pA-MNase)是一种融合蛋白,由Protein A和微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)组成。它兼具Protein A的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性,广泛应用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 特性与优势 高活性:pA-MNase具有高效的核酸内切酶活性,能够在短时间内将DNA降解为单核苷酸和寡核苷酸。 抗体结合能力:Protein A能够特异性结合免疫球蛋白的Fc区,使得pA-MNase可以被引导至目标蛋白所在的染色质区域。 低细胞需求量:适用于低至50个细胞的实验,尤其适合早期胚胎、干细胞和肿瘤等研究领域。 操作简便:实验流程简单,从细胞到二代测序文库的转化仅需1天。 应用场景 pA-MNase主要用于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术,这是一种替代传统ChIP-Seq的新技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。
高灵敏度:对核酸的迁移影响小,信噪比高,荧光信号强,背景信号低。
在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和效率是科研人员关注的重点。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性,成为了高精度基因扩增实验的理想选择。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。其核心成分是Phusion DNA聚合酶,这种聚合酶融合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力,能够在保证高准确性的前提下快速扩增DNA片段。Phusion酶的保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。
SYBR Green qPCR Mix是一种高性能的qPCR试剂,凭借其高灵敏度,为生物学研究的工具
等温扩增变色检测试剂盒是一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的核酸检测工具,能够在恒定温度下快速扩增目标DNA,并通过颜色变化直观地判断检测结果。这种技术无需复杂的温度循环设备,操作简便,适合快速检测病原体和微生物污染。 产品特性 高灵敏度:灵敏度比传统PCR方法高2-5个数量级,检测下限可达20-200 copies/μL。 快速检测:仅需1小时即可完成反应,适合快速诊断。 可视化结果:无需电泳,通过颜色变化(如紫罗兰或蓝紫色变为天蓝色或深天蓝色)即可判断结果。 防污染设计:采用dU掺入和热敏型UDG酶技术,有效防止扩增产物污染。 应用场景 该试剂盒广泛应用于检测生物样品中的病原体、微生物污染等。例如,碧云天的BeyoColor™等温扩增变色检测试剂盒可用于检测特定病原体的感染。此外,一些试剂盒还专门用于检测支原体污染,如BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒。 使用方法 配制反应体系:将LAMP Master Mix、引物、模板DNA、Bst DNA Polymerase等组分混合。 反应条件:在61-65℃下孵育30-60分钟。
由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。
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