顶青霉SHMCCD67407- 木层孔菌(基因组DNA)-Hanks平衡盐粉剂(1×HBSS,无酚红)
Taq DNA Polymerase是一种源自嗜热菌的耐热性DNA聚合酶。
在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和便捷性是科研人员追求的目标。Pfu Master Mix (2×) (With Dye)凭借其高保真性和预混染料的特性,成为了实现这一目标的理想选择。 Pfu Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自耐热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增的准确性。与传统Taq酶相比,Pfu酶的保真度更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 与无染料版本不同,Pfu Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料,这使得实验人员在进行PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。这种预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。
DNA Marker IV是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为500 bp、1000 bp、2000 bp、3500 bp、5500 bp和7000 bp。其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔宽度小于5 mm,每次取5 µL即可;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
适用于多种实验条件,包括不同的琼脂糖浓度和电泳电压(4-10 V/cm),能够根据实验需求灵活调整
10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。
因此,该缓冲液不仅适用于常规的DNA电泳,还特别适合用于终止酶促反应后的样品分析。
在分子生物学的研究中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的挑战之一。然而,随着Ultra-Long DNA Polymerase的出现,这一难题得到了有效解决。Ultra-Long DNA Polymerase以其卓越的长片段扩增能力和高保真性,成为了现代分子生物学实验中的强大工具。 Ultra-Long DNA Polymerase是一种专门针对长片段DNA扩增而设计的聚合酶。它结合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。例如,在研究大型基因或基因簇时,Ultra-Long DNA Polymerase能够提供完整的基因序列信息,避免因片段过短而导致的拼接错误。 除了长片段扩增能力外,Ultra-Long DNA Polymerase还具有高保真性。它通过内置的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增产物的准确性。
电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。
dCTP(脱氧胞苷三磷酸)是DNA合成中的关键核苷酸之一,广泛应用于多种分子生物学实验
碱性凝胶加样缓冲液(6×)是一种6倍浓缩的DNA上样缓冲液,专为碱性琼脂糖凝胶电泳设计。它以溴酚蓝和二甲苯青FF为指示剂,稀释至1×后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于电泳指示。产品特性主要成分:溴甲酚绿、二甲苯青FF、Ficoll 400、NaOH和EDTA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。使用方法稀释:将6×碱性凝胶加样缓冲液与DNA样品按1:5的比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。 避免污染:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。开封后尽快使用:试剂开封后应尽快使用,以防影响后续实验效果。碱性凝胶加样缓冲液(6×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为碱性琼脂糖凝胶电泳实验中的理想选择。
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