休哈塔假丝酵母SHMCCD53498-白蛋白检测试剂盒(溴甲酚绿微板法)-MethylophagamurataMethylophagamurataNCIMB13993
样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。
6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 是一种常用的核酸电泳辅助试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,能够帮助核酸样品沉入凝胶加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 的主要成分包括:甘油(Glycerol):含量为60%,用于增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔。溴酚蓝(Bromophenol Blue):含量为0.05%,作为示踪染料,用于观察电泳进程。二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。橙黄 G(Orange G):部分配方中添加橙黄 G,进一步扩展示踪范围。Tris-HCl 缓冲液:10 mM,pH 7.6,用于维持电泳过程中的稳定环境。EDTA:60 mM,用于螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景该缓冲液主要用于核酸(DNA 和 RNA)的琼脂糖凝胶电泳,适用于多种核酸样品的分析和检测。它能够帮助科研人员更清晰地观察核酸片段的迁移情况,从而准确判断核酸的大小和完整性。
上样与电泳:混合均匀后,将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。
在分子生物学和生物化学研究中,DNA的完整性和准确性对于实验的成功至关重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG),特别是来自大肠杆菌(E. coli)的UDG,是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶。UDG (5U/µl)以其高效的修复能力和精准的特异性,成为了许多实验中不可或缺的工具。 UDG的作用机制 UDG是一种DNA修复酶,能够特异性识别DNA中的尿嘧啶(U),并将其从DNA链中移除。这种酶的作用机制基于其对尿嘧啶的高亲和力。在DNA合成过程中,尿嘧啶可能会由于脱氨反应或其他化学修饰而意外掺入DNA链中。UDG通过识别这些尿嘧啶,并将其从DNA链中切除,从而防止错误碱基的积累。这种修复过程是维持DNA完整性和基因组稳定性的重要机制。 UDG在实验中的应用 PCR反应中的防污染:在PCR实验中,UDG常用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在PCR反应前加入UDG,可以将引物中的尿嘧啶降解,从而避免引物在反应前的非特异性结合。这种方法被称为“热启动PCR”,能够显著提高PCR反应的特异性和灵敏度。
产品中已含有1×Loading Buffer,可直接取2-5 μl上样,无需额外处理,使用极为便捷
DNA Marker VI是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp。其中,2500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,使用方便。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件: 凝胶浓度:建议使用1.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存至少2年。
6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是核酸电泳实验中的重要工具,其高效、稳定且操作简便的特性。
Tris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、硼酸和EDTA组成,具有强大的缓冲能力,能够维持稳定的pH值,从而提高电泳的分辨率。产品特性成分:主要由900 mM Tris-硼酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TBE工作液含有90 mM Tris-硼酸和2 mM EDTApH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。
缓冲液中的 Tris-HCl 和 EDTA 组分能够维持电泳过程中的稳定环境。
Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。
尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。
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