幻灯二

组织细胞固定液(40%PFA)-平盖灵芝树舌-土耳其凸脐孢菌

DL2000 II主要用于琼脂糖凝胶电泳中作为双链线状DNA分子量大小的参照适用于DNA片段大小分析

在分子生物学实验中,DNA合成是许多技术的核心,而dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)作为一种特殊的试剂,为DNA合成提供了更多可能性。这种混合液结合了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),为PCR反应和其他DNA合成实验提供了多功能的支持。 dNTP/dUTP Mixture的独特优势 dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)是一种精心设计的混合液,其中每种dNTP的浓度为2.5 mM,而dUTP的浓度为5 mM。这种独特的配方使其在多种实验中表现出色: PCR反应中的应用:在传统的PCR反应中,dNTPs是DNA合成的基本原料。然而,dUTP的加入为PCR反应提供了额外的功能。例如,某些PCR反应需要引入dUTP来标记DNA,或者在后续实验中利用尿嘧啶糖基化酶(UNG)去除dU,从而实现PCR产物的特异性降解。这种混合液能够满足这些特殊需求,同时保持反应的高效性和特异性。

将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中,使其终浓度为 1×,轻轻混合后倒胶。

3×甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专门用于核酸电泳的辅助试剂,特别适用于RNA样品的变性电泳。它能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分该缓冲液的主要成分包括:90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。0.075% 二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 0.075% 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。30 mM EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。变性处理:将混合后的样品在 70℃加热变性 5-15 分钟,然后立即置于冰上冷却,以防止核酸复性。电泳上样:将处理后的样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景3×甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于RNA样品的变性电泳,适用于甲醛变性或非变性的琼脂糖凝胶电泳以及聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可用于寡聚单链DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。

高灵敏度:对核酸的迁移影响小,信噪比高,荧光信号强,背景信号低。

在生命科学领域,Taq DNA Polymerase犹如一颗璀璨的明珠,闪耀着独特的光芒。它是一种耐热的DNA聚合酶,最初是从一种嗜热细菌——栖热水生菌(Thermus aquaticus)中分离出来的。这种细菌生活在高温的温泉环境中,而Taq酶也因此具备了在高温下稳定工作的能力,这使得它在分子生物学实验中扮演了不可或缺的角色。 Taq DNA Polymerase的主要功能是催化DNA的合成。在聚合酶链式反应(PCR)中,Taq酶的作用尤为关键。PCR是一种用于快速扩增特定DNA片段的技术,它通过反复的变性、退火和延伸三个步骤来实现DNA的指数级扩增。在变性阶段,DNA双链被高温分离成单链;退火阶段,引物与模板DNA结合;而在延伸阶段,Taq酶便大显身手。它能够以单链DNA为模板,从引物的3'端开始,按照碱基互补配对原则,将一个个脱氧核苷酸添加到新链上,从而合成与模板互补的DNA链。由于Taq酶在高温下仍能保持活性,这使得PCR反应可以在较高的温度下进行,大大提高了反应的特异性和效率。

在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与溴化乙锭相当

2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。 使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。

4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料,其灵敏度与EB相当,能检测到低浓度的核酸。

RcView 吖啶橙核酸染料是一种新型的荧光染料,专为核酸染色设计,可广泛应用于琼脂糖凝胶电泳和细胞染色实验中。它不仅具有与传统溴化乙锭(EB)相当的灵敏度,还具有更高的安全性和特异性。产品特性RcView 吖啶橙核酸染料是一种细胞可渗透的荧光染料,能够与核酸结合并发出强烈的荧光信号。在紫外光下,双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。安全性与传统的溴化乙锭(EB)相比,RcView 吖啶橙核酸染料经过多项致突变性试验验证,结果均为阴性,是一种更安全的替代品。这使得它在实验室使用中更加环保和安全,减少了对实验人员和环境的风险。 使用方法RcView 吖啶橙核酸染料的使用方法与溴化乙锭(EB)相同,操作简便。在琼脂糖凝胶电泳中,只需将RcView加入凝胶溶液中,轻轻摇匀后倒胶即可。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带,无需额外的脱色或洗涤步骤。应用范围RcView 吖啶橙核酸染料不仅适用于DNA和RNA的凝胶电泳分析,还可用于细胞染色实验。它能够透过细胞膜,使细胞核中的DNA和RNA染

Plant Direct PCR Master Mix (2×) 是一种专为植物样本设计的预混液

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。

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