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虽然连接效率较低,但T4 DNA连接酶也可以用于平末端DNA片段的连接。
碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的碱性DNA电泳缓冲液,主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成,呈强碱性。它广泛应用于碱性琼脂糖凝胶电泳实验中。产品特性成分:主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成。保存条件:室温保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。包装:通常以500 mL包装提供。使用方法稀释:使用无菌蒸馏水或去离子水将10×缓冲液稀释至1×工作液。制备琼脂糖凝胶:在三角烧瓶或玻璃瓶中加入准确量的琼脂糖粉和定量的水。加热使琼脂糖完全溶解,注意搅拌防止烧焦。冷却至55°C后,加入0.1倍体积的10×碱性凝胶电泳缓冲液,迅速灌制凝胶。电泳操作:将稀释后的1×缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加入样品后开始电泳,建议使用小于3.5 V/cm的电压。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。废弃物处理:使用后的废弃物应按照相关法律法规进行处理。
在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂。
在生物体的微观世界里,T3 RNA聚合酶扮演着至关重要的角色。它是一种专门的酶,主要存在于某些噬菌体中,负责催化RNA的合成过程。这种酶具有高度的专一性,它能够精准地识别并结合到特定的启动子序列上,就像一把钥匙精准地插入对应的锁孔一样。一旦结合,T3 RNA聚合酶就会以DNA为模板,按照碱基互补配对原则,将一个个核苷酸连接起来,合成出一条与DNA模板链互补的RNA链。 这种RNA合成过程是基因表达的关键步骤。T3 RNA聚合酶的工作效率极高,它能够快速而准确地转录出所需的RNA分子,为蛋白质的合成提供必要的模板。而且,它在转录过程中还能保持高度的准确性,尽量减少错误的发生,这对于保证生物体遗传信息的正确传递至关重要。 T3 RNA聚合酶不仅在基础的生物学研究中有着重要的应用价值,还为基因工程等前沿领域提供了强有力的工具。科学家们可以利用它来精确地控制基因的表达,研究基因的功能,甚至开发出新的基因治疗策略。T3 RNA聚合酶就像一位精准的工匠,以其独特的功能和作用,在生命的舞台上发挥着不可替代的作用,为生命科学的发展贡献着自己的力量。
T7 RNA聚合酶源自T7噬菌体,是一种单亚基酶,结构简单却功能强大。
在分子生物学的研究中,核糖核酸酶T1(RNase T1)以其独特的酶解特性和在RNA序列分析中的重要作用,成为科学家们手中不可或缺的“利器”。 核糖核酸酶T1是一种能够特异性切割RNA的酶,它主要作用于鸟嘌呤(G)残基的3'端,将RNA分子切割成含有鸟嘌呤的单核苷酸和寡核苷酸片段。这种酶的特异性切割能力使其在RNA序列分析中具有极高的应用价值。通过RNase T1对RNA进行部分水解,科学家们可以获得一系列特定的RNA片段,这些片段可以进一步用于确定RNA的序列结构和功能特性。 在实际应用中,RNase T1被广泛用于研究RNA的二级结构和三级结构。例如,在分析tRNA和rRNA的结构时,RNase T1可以用来切割特定的G残基,从而揭示RNA分子的折叠模式和功能区域。此外,RNase T1还被用于研究RNA与蛋白质的相互作用,通过切割RNA分子,科学家们可以了解蛋白质结合位点的具体位置和作用机制。 RNase T1的酶解特性还使其在RNA降解和修饰研究中发挥重要作用。
最佳反应温度为25℃,反应缓冲液中通常含有ATP、MgCl₂和PEG 6000。
T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入R55K和K227Q双点突变,显著降低了非特异性连接背景,同时保持了高效的连接活性。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'末端,无需ATP参与反应。 特点 高效连接:突变型酶在保持高效连接活性的同时,减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无需ATP:连接反应不依赖ATP,降低了背景连接。 高纯度:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 稳定性高:在-20℃条件下可保存3年,避免反复冻融。 应用 T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA、siRNA和piRNA文库构建。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。 灭活条件:65℃加热20分钟。 反应体系:通常需要加入PEG 8000以提高连接效率。
产品中预混了低浓度的ROX参考染料,适用于多种qPCR仪器平台,无需额外添加ROX,减少了实验误差
RNA/DNA抽提试剂盒是一种广泛应用于分子生物学实验的工具,能够同时提取样本中的DNA和RNA,具有高效、简便、纯度高的特点。它通过优化的化学和物理方法,从细胞、组织或体液中分离出高质量的核酸,适用于多种下游实验。 工作原理 RNA/DNA抽提试剂盒的工作原理基于核酸的物理化学特性。其核心步骤包括: 细胞裂解:使用含有离液盐(如盐酸胍、硫氰酸胍)的裂解缓冲液破坏细胞结构,释放核酸。 核酸分离:通过硅胶膜吸附技术,核酸在特定的盐浓度下选择性地结合到硅胶膜上,而杂质则被去除。 洗涤与洗脱:经过洗涤步骤去除残留杂质后,纯化的核酸通过低盐或水洗脱,得到高纯度的DNA和RNA。 优势 高效性:能够同时提取DNA和RNA,节省时间和成本。 高纯度:提取的核酸纯度高,适用于多种下游实验,如PCR、测序等。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括细胞、组织、血液等。 操作简便:步骤简单,无需复杂的设备。 应用场景 RNA/DNA抽提试剂盒广泛应用于基因组学研究、临床诊断和分子生物学实验。
如果凝胶中预先加入 EB,电泳结束后紫外灯下观察时200 bp 以下条带亮度较弱,可通过凝胶后染方法
在分子生物学研究中,RNA转录是探索基因表达、蛋白质合成以及RNA功能的关键步骤。T7高产量RNA转录试剂盒以其卓越的性能和高效的RNA合成能力,成为实验室中不可或缺的工具,为科学家们提供了稳定可靠的RNA合成解决方案。 T7高产量RNA转录试剂盒的核心是T7 RNA聚合酶,这种酶以其高效性和特异性而闻名。它能够特异性地识别T7噬菌体启动子序列,并在短时间内合成大量的RNA。试剂盒通过优化反应条件,确保了RNA合成的高效率和高产量。与传统的转录方法相比,T7高产量RNA转录试剂盒能够在更短的时间内完成转录反应,大大提高了实验效率。 在实际应用中,T7高产量RNA转录试剂盒广泛应用于多个领域。例如,在基因表达研究中,它可以用于合成特定的mRNA,用于后续的翻译实验或基因功能研究。在RNA结构分析中,该试剂盒能够合成高质量的RNA样本,用于核磁共振(NMR)或X射线晶体学等结构生物学研究。此外,它还可以用于合成RNA探针,用于原位杂交或基因芯片分析,帮助科学家快速定位和检测目标基因。
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