短波单胞菌- 大孢链霉菌(基因组DNA)-木霉CGMCC3.4004
对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。
λ DNA HindIII是一种经典的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII Marker由8条双链DNA条带组成,片段大小分别为125 bp、231 bp、564 bp、6557 bp、9416 bp13589 bp、20270 bp和23130 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
在现代分子生物学研究与临床诊断领域,实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其高灵敏度、高特异性和快速检
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。
在模拟污染实验中,dUTP/UDG防污染系统能够有效降解含尿嘧啶的DNA污染,避免了假阳性结果的出现
在现代分子生物学实验室中,Taq PCR Master Mix(2×)是一种极为重要的实验试剂,它为聚合酶链式反应(PCR)的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性,成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix(2×)是一种预先配制好的PCR反应体系,其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs(脱氧核苷三磷酸)、反应缓冲液以及其他必要的成分,但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时,只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中,即可快速配制好反应体系,大大简化了实验操作步骤,节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix(2×)的高效性主要体现在以下几个方面。首先,它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力,能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次,预混液中的反应缓冲液经过优化,能够为Taq酶提供最佳的反应环境,确保反应的高效进行。此外,dNTPs的浓度也经过精确调整,能够满足PCR反应的需求,同时避免因过量而导致的副反应。
这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计,使得实验操作更加便捷高效。
25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液是一种用于核酸电泳的辅助试剂,能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,确保样品能够沉入凝胶加样孔。EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液广泛应用于核酸的琼脂糖凝胶电泳实验中。它适用于检测 DNA 和 RNA 的片段大小、纯度以及分离效果。使用方法在使用前,需将 25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液稀释至所需浓度(如 6× 或 5×),然后与核酸样品按比例混合(通常为 1:1)。混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中进行电泳。储存条件该缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液凭借其高效的样品沉降能力和清晰的示踪效果,已成为核酸电泳实验中不可或缺的工具,为科研人员提供了便捷和可靠的实验支持。
将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液
在现代分子生物学研究与临床诊断领域,实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其高灵敏度、高特异性和快速检测能力而备受青睐。而其中,Probe qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus)更是凭借其卓越的性能脱颖而出,成为众多科研人员与实验室的首选试剂。 这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计,使得实验操作更加便捷高效。只需简单地添加模板和引物,即可快速配制反应体系,大大节省了实验时间与精力。同时,它含有高浓度的ROX被动荧光染料,能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保实验结果的准确性和重复性,这对于需要精确定量的实验尤为重要。 更值得一提的是,该试剂中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)成分。UDG能够降解含有尿嘧啶的引物或模板,有效防止引物二聚体的形成以及残留DNA的污染,从而显著提高了qPCR反应的特异性和可靠性。在进行高灵敏度的基因检测时,这一特性尤为关键,能够有效避免假阳性结果的出现。
高灵敏度:对核酸的迁移影响小,信噪比高,荧光信号强,背景信号低。
等温扩增变色检测试剂盒是一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的核酸检测工具,能够通过颜色变化直观地检测样品中是否存在目标DNA。该技术利用特异性引物和链置换DNA聚合酶(如Bst DNA Polymerase),在恒定温度下快速扩增DNA,无需复杂的温度循环。工作原理LAMP技术通过针对目标基因的不同区域设计4-6条特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(如Bst DNA Polymerase)启动DNA合成,形成哑铃状互补链,并通过连续链置换进入循环扩增阶段。扩增产物的积累会导致反应体系的颜色变化,从而实现可视化检测。产品特点高灵敏度:灵敏度比传统PCR方法高2-5个数量级,检测下限可达20-200 copies/μL。快速检测:仅需1小时即可完成反应,适合快速检测。可视化结果:无需电泳,通过颜色变化(如紫罗兰或蓝紫色变为天蓝色或深天蓝色)即可判断结果。防污染设计:采用dU掺入和热敏型UDG酶技术,有效防止扩增产物污染。应用场景该试剂盒广泛应用于检测生物样品中的病原体、微生物污染等。例如,碧云天的BeyoColor™等温扩增变色检测试剂盒可用于检测特定病原体的感染。此
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