Recombinant Human GARP&Latent TGF Beta 2 Complex Protein,His-Avi Tag-Recombinant Human GITR-人乳腺癌细胞,HCC1937,SHMCCE00139
在实验中,牛痘DNA拓扑异构酶I通常在37℃下孵育,反应体系中需包含特定的反应缓冲液。
ris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、磷酸和EDTA组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由900 mM Tris-磷酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TPE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
在分子生物学的微观世界中,T7 RNA聚合酶宛如一位技艺高超的“分子工程师”。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。SYBR Green qPCR Mix (2×)作为一种专为qPCR设计的预混液,凭借其高效、便捷和高灵敏度的特点,成为了许多实验室的首选试剂。 SYBR Green qPCR Mix的核心优势 SYBR Green qPCR Mix (2×)是一种预配制的高浓度反应体系,专为qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green荧光染料以及热启动Taq DNA聚合酶。SYBR Green是一种能够特异性结合双链DNA的小分子荧光染料,在qPCR过程中,随着DNA扩增产物的增加,SYBR Green发出的荧光信号也随之增强。通过实时监测荧光信号的变化,可以实现对目标基因的定量分析。 高灵敏度与特异性 SYBR Green qPCR Mix (2×)具有极高的灵敏度,能够检测到低丰度的基因表达。其优化的反应体系确保了高效的DNA扩增,即使在复杂的样本中也能获得准确的定量结果。
它不仅提高了实验的准确性和可靠性,还为科研人员提供了便捷的操作体验。
2× DNA/RNA变性上样缓冲液是一种专为核酸电泳设计的浓缩缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的变性凝胶电泳。它通过变性处理,确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,从而实现更清晰的分离效果。 组成成分 2× DNA/RNA变性上样缓冲液的主要成分包括: 甲酰胺:用于变性核酸,确保核酸在电泳中以单链形式迁移。 溴酚蓝和二甲苯青:作为电泳指示剂,便于观察电泳进程。 SDS:一种阴离子表面活性剂,有助于核酸的变性。 EDTA:螯合金属离子,防止核酸降解。 使用方法 样品混合:将DNA或RNA样品与2×变性上样缓冲液按1:1的比例混合,使最终浓度为1×。 变性处理:将混合后的样品在95℃加热5分钟,然后迅速冷却至冰上。 上样:将处理后的样品加入凝胶加样孔中。 电泳:在适当的电压下进行电泳,直至指示剂迁移至凝胶的合适位置。 优势 高效变性:确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,提高分离效果。 清晰指示:溴酚蓝和二甲苯青作为指示剂,便于实时观察电泳进程。 高纯度:无RNase污染,确保RNA样品的完整性。 适用范围广:适用于DNA和RNA的变性电泳,包括琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。
上样与电泳:混合均匀后,将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。
T4 UvsY蛋白是一种来源于噬菌体T4的重组调节蛋白,分子量约为16 kDa。它在T4 UvsX重组酶执行同源重组过程中起到关键的促进作用。具体来说,UvsY蛋白能够帮助UvsX重组酶侵入单链DNA(ssDNA)与单链结合蛋白(如T4 gp32)形成的复合物,促进gp32的释放,从而为UvsX重组酶与ssDNA的结合创造条件。此外,UvsY蛋白还可增强UvsX蛋白的ATPase活性,降低UvsX发挥活性所需的最低浓度,从而促进链置换反应。产品特性增强UvsX活性:UvsY蛋白能够显著提高UvsX重组酶的活性,促进链置换反应。无核酸酶活性:该蛋白本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。 等温扩增应用:UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心组分之一,能够在37-42℃的等温条件下高效扩增DNA。应用场景T4 UvsY蛋白主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA)。RPA技术是一种快速、灵敏的核酸检测方法,能够在37-42℃的恒温条件下进行反应,无需复杂的热循环设备。该技术广泛应用于病原体检测、基因分析以及现场快速诊断等领域。
它的这种广泛作用能力使得它在细胞内RNA代谢的多个环节中都发挥着关键作用。
在现代分子生物学研究与临床诊断领域,实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其高灵敏度、高特异性和快速检测能力而备受青睐。而其中,Probe qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus)更是凭借其卓越的性能脱颖而出,成为众多科研人员与实验室的首选试剂。 这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计,使得实验操作更加便捷高效。只需简单地添加模板和引物,即可快速配制反应体系,大大节省了实验时间与精力。同时,它含有高浓度的ROX被动荧光染料,能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保实验结果的准确性和重复性,这对于需要精确定量的实验尤为重要。 更值得一提的是,该试剂中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)成分。UDG能够降解含有尿嘧啶的引物或模板,有效防止引物二聚体的形成以及残留DNA的污染,从而显著提高了qPCR反应的特异性和可靠性。在进行高灵敏度的基因检测时,这一特性尤为关键,能够有效避免假阳性结果的出现。
将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中,使其终浓度为 1×,轻轻混合后倒胶。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。
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