紫变红链霉菌-伊氏李斯特氏菌ListeriaivanoviiATCC19119-噬肌醇毕赤酵母SHMCCD53488
它特别适合于需要在载体任意位置插入片段的实验,例如基因编辑、突变导入和基因合成等。
Cas9核酸酶(SpCas9)是一种源自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)的CRISPR相关蛋白,是基因编辑领域中最为广泛使用的工具之一。它通过与导向RNA(gRNA)结合,能够特异性地识别并切割目标DNA序列,从而实现精确的基因编辑。 工作原理 SpCas9通过识别特定的原间隔相邻基序(PAM)序列(通常是NGG),结合到目标DNA上。gRNA引导SpCas9定位到目标位点,随后SpCas9的两个核酸酶结构域(RuvC和HNH)分别切割目标DNA的两条链,形成双链断裂(DSB)。细胞通过非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)机制修复DSB,从而实现基因敲除或精确插入。 特点与优势 高效性:SpCas9能够高效地切割目标DNA,实现基因敲除或插入。 特异性:通过设计不同的gRNA,SpCas9可以精确靶向基因组中的任何位置。 多功能性:除了基因编辑,SpCas9还被用于基因调控、表观遗传修饰和基因组成像。 可编程性:通过改变gRNA序列,可以轻松调整SpCas9的靶向位点。
RNase H广泛存在于生物体内,从细菌到人类细胞中都有其身影。
Maspin(Mammary Serine Protease Inhibitor)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,最初是在乳腺组织中发现的。它在多种组织中表达,包括乳腺、前列腺、肺和卵巢等。Maspin在细胞生长、分化和组织修复中发挥重要作用,尤其在癌症抑制和肿瘤进展中具有显著的调控作用。 Maspin的功能 Maspin的主要功能之一是抑制蛋白酶的活性,从而调节细胞外基质的降解和细胞迁移。它通过抑制多种蛋白酶,如组织蛋白酶和基质金属蛋白酶,维持细胞外基质的稳定性,防止细胞的异常迁移和侵袭。此外,Maspin还能够促进细胞分化,抑制细胞增殖,从而在癌症抑制中发挥重要作用。 在组织修复过程中,Maspin通过调节细胞外基质的合成和重塑,促进组织的正常修复。它能够增强细胞间的黏附,维持组织的完整性,从而在伤口愈合和组织再生中发挥重要作用。 Maspin在癌症中的作用 Maspin在多种癌症中表现出显著的抑制作用。研究表明,Maspin在乳腺癌、前列腺癌和卵巢癌等肿瘤组织中的表达水平通常较低,而在正常组织中表达较高。
它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。
IP-10(Interferon-γ-Inducible Protein-10),即干扰素γ诱导蛋白-10,是一种属于CXC趋化因子家族的细胞因子。它在免疫反应和炎症过程中发挥着重要作用,主要通过吸引和激活特定类型的免疫细胞,增强机体对病原体的防御能力。 一、IP-10的结构与功能 IP-10的基因编码位于染色体4的趋化因子基因簇中,其分子量约为10 kDa。它通过与CXCR3受体结合,发挥其趋化作用,吸引T细胞和自然杀伤(NK)细胞向炎症部位迁移。此外,IP-10还能激活这些细胞,促进其增殖和功能发挥,进一步增强免疫反应。IP-10在多种细胞类型中表达,包括巨噬细胞、内皮细胞和上皮细胞等,尤其是在受到干扰素γ等细胞因子的刺激时,其表达水平显著升高。 二、IP-10在免疫反应中的作用 在免疫反应中,IP-10的表达是机体对病原体入侵的重要响应机制。它不仅能够吸引T细胞和NK细胞到达感染部位,还能通过激活这些细胞,增强其杀伤能力。此外,IP-10还参与调节血管内皮细胞的通透性,促进免疫细胞的外渗,加速炎症部位的修复过程。
在人类免疫系统的复杂网络中,IFN-γ R II(干扰素γ受体II)扮演着至关重要的角色。
Tris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、硼酸和EDTA组成,具有强大的缓冲能力,能够维持稳定的pH值,从而提高电泳的分辨率。产品特性成分:主要由900 mM Tris-硼酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TBE工作液含有90 mM Tris-硼酸和2 mM EDTApH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。
它不仅提高了实验的准确性和可靠性,还为科研人员提供了便捷的操作体验。
在细胞内复杂的蛋白质调控网络中,泛素化是一种关键的蛋白质修饰过程,它在蛋白质降解、细胞周期调控、信号转导等生物学过程中发挥着重要作用。泛素结合酶UBE2N(Ubiquitin Conjugating Enzyme E2N)及其复合物在泛素化途径中扮演着重要角色,通过与其他蛋白的协同作用,高效地完成泛素的传递和蛋白质的修饰。 泛素结合酶UBE2N复合物的特性 泛素结合酶UBE2N是一种高度特异性的酶,能够特异性地识别并结合由E1激活的泛素。在泛素化反应的第二步中,UBE2N通过其活性位点的半胱氨酸残基与泛素形成共价键,从而将泛素从E1转移到自身。这一过程为后续的泛素连接酶E3介导的泛素转移提供了必要的中间体。UBE2N在多种细胞类型中广泛表达,并在多种生物学过程中发挥重要作用,特别是在免疫应答和细胞周期调控中。 UBE2N通常以复合物的形式存在,与泛素结合酶E2D(UBE2D)家族成员形成异二聚体复合物,如UBE2N/UBE2V2。这种复合物形式显著增强了UBE2N的活性和泛素化效率,使其在多泛素链的形成中发挥关键作用。 广泛的应用 UBE2N复合物在分子生物学研究中具有广泛的应用。
总之,TSLP作为人体免疫系统中的关键因子,其在免疫调节中的作用复杂而多样。
Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)是一种位点特异性重组酶,最早于1981年从P1噬菌体中发现。它能够识别并结合特定的DNA序列——LoxP位点,进而引发DNA重组。LoxP位点是一个34bp的DNA序列,包含两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区。 工作原理 Cre重组酶通过与LoxP位点的反向重复序列结合形成二聚体,进而形成四聚体复合物。随后,Cre重组酶切割LoxP位点之间的DNA片段,并通过DNA连接酶重新连接切口。重组结果取决于LoxP位点的方向和位置。例如: 若两个LoxP位点方向相同,Cre重组酶可切除它们之间的DNA片段。 若方向相反,则可导致DNA片段翻转。 若LoxP位点位于不同DNA链上,Cre重组酶可介导DNA链交换或染色体易位。 应用 Cre/LoxP系统广泛应用于基因编辑领域,包括基因敲除、基因插入、基因翻转和染色体重排等。它特别适合构建条件性基因敲除小鼠模型,通过组织特异性启动子控制Cre重组酶的表达,从而实现对特定组织或细胞中目标基因的时空特异性敲除。
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