幻灯二

枯草芽孢杆菌SHMCCD53062- 黑孢球(基因组DNA)-香菇SHMCCD69579

LoxP位点是一个34bp的DNA序列,包含两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区。

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤: 复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。 切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。 结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。 单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。

在分子生物学研究中,RNase R也具有重要的应用价值。

T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入R55K和K227Q双点突变,显著降低了非特异性连接背景,同时保持了高效的连接活性。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'末端,无需ATP参与反应。 特点 高效连接:突变型酶在保持高效连接活性的同时,减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无需ATP:连接反应不依赖ATP,降低了背景连接。 高纯度:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 稳定性高:在-20℃条件下可保存3年,避免反复冻融。 应用 T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA、siRNA和piRNA文库构建。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。 灭活条件:65℃加热20分钟。 反应体系:通常需要加入PEG 8000以提高连接效率。

λ DNA/HindIII酶切产物是琼脂糖凝胶电泳中常用的分子量标准用于快速准确地估算DNA片段大小

在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。

6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 是一种常用的核酸电泳辅助试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中。

在分子生物学研究中,RNA转录是基因表达研究、RNA功能分析以及分子诊断等领域的关键环节。SP6高产量RNA转录试剂盒凭借其精准高效的RNA合成能力,成为实验室中不可或缺的重要工具,为科学家们提供了稳定可靠的RNA合成解决方案。 SP6高产量RNA转录试剂盒的核心是SP6 RNA聚合酶,这是一种高度特异性的酶,能够特异性地识别SP6噬菌体启动子序列,并在短时间内高效合成大量的RNA。与传统的转录方法相比,SP6高产量RNA转录试剂盒通过优化反应条件,显著提高了RNA的合成效率和产量。该试剂盒能够在较短的时间内完成高质量的RNA转录,大大提升了实验效率。 在实际应用中,SP6高产量RNA转录试剂盒广泛应用于多个领域。例如,在基因表达研究中,它可以用于合成特定的mRNA,用于后续的翻译实验或基因功能研究。在RNA结构分析中,该试剂盒能够合成高质量的RNA样本,用于核磁共振(NMR)或X射线晶体学等结构生物学研究。此外,它还可以用于合成RNA探针,用于原位杂交或基因芯片分析,帮助科学家快速定位和检测目标基因。

In-Fusion Cloning Kit 以其高效、简便灵活的特点,正在成为分子克隆实验中的首选。

在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。

T4 DNA聚合酶是一种来源于T4噬菌体的酶,具有独特的酶活性和广泛的应用价值。

Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于DNA和RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由450 mM Tris-硼酸和10 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释5倍后得到的0.5×TBE工作液含有45 mM Tris-硼酸和1 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将5×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释5倍,制备0.5×工作液。电泳操作:将稀释后的0.5×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。

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